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中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所
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昆明植物所發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新穎的參與植物抗蟲(chóng)的Kunitz型的胰蛋白酶抑制基因

文章來(lái)源:資源植物與生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室  |  發(fā)布時(shí)間:2023-04-25  |  作者:吳勁松  |  瀏覽次數(shù):  |  【打印】 【關(guān)閉

 

  昆蟲(chóng)和動(dòng)物通過(guò)分泌胰蛋白酶來(lái)消化食物,從而能夠吸收重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)-蛋白質(zhì)。很多植物受到啃食的時(shí)候,特別是茄科植物和豆科植物,會(huì)積累高水平的胰蛋白酶抑制劑活性來(lái)抵御昆蟲(chóng)和食草動(dòng)物。這些高水平的胰蛋白酶抑制劑活性是來(lái)自一個(gè),還是多個(gè)基因編碼的蛋白?這些蛋白基因的調(diào)控方式是否一樣?如果不一樣,有哪些調(diào)控方式?這些都是植物抗蟲(chóng)領(lǐng)域的重要科學(xué)問(wèn)題。

  中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所植物次生代謝分子調(diào)控專題攻關(guān)組以漸狹葉煙草為模式,結(jié)合了轉(zhuǎn)錄組分析、基因沉默和超表達(dá)、以及蛋白活性研究手段,在2021年發(fā)現(xiàn)了一個(gè)Kunitz型的胰蛋白酶抑制基因NaKTI2Yin et al., 2021 Plant Cell Reports)。今年又發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的Kunitz型的胰蛋白酶抑制劑基因NaMLP。 

  昆明植物園扶荔宮中的明星植物神秘果樹(shù)以其果實(shí)中能合成一種特殊的蛋白質(zhì)-神秘果素(miraculin)而聞名。吃了神秘果半小時(shí)到兩小時(shí)內(nèi),舌頭上的敏酸味蕾暫時(shí)被神秘果素抑制,而對(duì)甜味敏感的味蕾感受器卻活躍起來(lái),這時(shí)再吃酸性水果,只會(huì)感受到甜味。20世紀(jì)60年代,周恩來(lái)總理訪問(wèn)西非時(shí),加納共和國(guó)的領(lǐng)導(dǎo)人把神秘果樹(shù)作為禮物贈(zèng)與總理。研究人員注意到NaMLP這個(gè)基因是因?yàn)樗谋磉_(dá)能被昆蟲(chóng)的口水和鏈格孢菌的感染高水平的誘導(dǎo),而且這個(gè)基因編碼的蛋白和神秘果素有較高的氨基酸序列相似性,因此它被命名為類似神秘果素蛋白(NaMLPmiraculin-like protein)。  

  研究人員進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),盡管NaMLP蛋白的氨基酸序列和已知的Kunitz型胰蛋白酶抑制劑的序列相似性較低,但是它具有已知Kunitz型胰蛋白酶抑制劑的功能結(jié)構(gòu)域。它有可能和神秘果素蛋白類似,可以不可逆和一些受體或酶結(jié)合。NaMLP基因沉默后,研究人員發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植物的抗蟲(chóng)性降低,同時(shí)胰蛋白酶抑制劑活性也顯著性降低了。接著,研究人員又創(chuàng)制了NaMLP穩(wěn)定超表達(dá)的植物,發(fā)現(xiàn)其抗蟲(chóng)性增強(qiáng),而且蛋白粗提液中胰蛋白酶抑制劑活性也顯著性增強(qiáng)了。這些實(shí)驗(yàn)均證明了NaMLP編碼的蛋白具有胰蛋白酶抑制劑活性,是植物抗蟲(chóng)的重要基因。很有意思的是,和前面發(fā)現(xiàn)的NaKTI2不同,NaKTI2的表達(dá)依賴于轉(zhuǎn)錄因子WRKY3WRKY6,而NaMLP受到的是茉莉酸和乙烯信號(hào)的協(xié)同誘導(dǎo)。 

  研究人員系統(tǒng)的工作證明了植物受到昆蟲(chóng)啃食后,會(huì)激活不同的信號(hào)系統(tǒng),上調(diào)了不同的胰蛋白酶抑制劑編碼基因,如:JA控制的NaPI,WRKY3調(diào)控的NaKTI2,以及茉莉酸和乙烯協(xié)同調(diào)控的NaMLP(見(jiàn)下圖)。在生化與分子生物學(xué)水平上,揭示了基于胰蛋白酶抑制劑的抗蟲(chóng)反應(yīng)的復(fù)雜性,編碼胰蛋白酶抑制劑基因的多樣性,以及調(diào)控的多樣性,從而豐富了植物抗蟲(chóng)反應(yīng)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。 

 

   

  研究成果以NaMLP, a new identified Kunitz trypsin inhibitor regulated synergistically by JA and ethylene, confers Spodoptera litura resistance in Nicotiana attenuata為題,在線發(fā)表于植物的經(jīng)典期刊Plant Cell Reports。博士研究生楊茂和程俊斌為本論文的共同一作,通訊作者是吳勁松研究員。該論文得到了自然科學(xué)基金(31670262資助。 

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(責(zé)任編輯:李雪)

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